Los microorganismos son un grupo de organismos microscópicos que están ampliamente distribuidos en la naturaleza e invisibles a simple vista, incluyendo bacterias, espiroquetas, rickettsias, clamidias, micoplasmas, actinomicetos, hongos, virus, etc., con estructura simple, y existen en una sola célula, grupo celular o estado no celular. En condiciones de proporcionar nutrientes y un entorno adecuado, generalmente pueden vivir de forma independiente y crecer rápidamente. Para evitar la muerte y la contaminación de los microorganismos, mantener sus propiedades originales básicamente estables y facilitar la investigación y el uso, es necesario utilizar la tecnología de conservación de cepas. Aquí hay algunos métodos comunes para la conservación de bacterias.
Conservación criogénica
Este método es adecuado para la mayoría de los microorganismos y virus que necesitan conservación a largo plazo. El principio es que en el entorno de temperatura ultrabaja, la actividad metabólica microbiana se detiene y, en general, cuanto más baja es la temperatura, mejor es el efecto.
Método de ahorro
Utilice un tubo de crioconservación para conservar la bacteria.ria, y al mismo tiempo necesitan agentes protectores, como glicerina, polvo de carnero desengrasado o dimetilsulfóxido. El tubo de almacenamiento congelado que contiene bacterias se coloca en un refrigerador a - 60~- 80 grados para su congelación y almacenamiento.
Método de conservación de parafina líquida.
El método de conservación con parafina líquida es aplicable a algunas bacterias que no pueden descomponer la parafina, como la levadura, el bacilo, el penicillium, el aspergillus, etc. Algunas bacterias y hongos no son adecuados para la conservación con este método. El método de parafina líquida utiliza parafina líquida para cubrir, se inhibe el metabolismo microbiano y se retrasa el envejecimiento bacteriano. El método de parafina puede evitar que entre oxígeno, lo que hace que las bacterias aeróbicas no puedan seguir creciendo. Al mismo tiempo, si el agua del medio de cultivo se evapora, es fácil que se produzca la muerte bacteriana. El método de parafina puede evitar que el agua en el medio de cultivo se evapore y prolongar el tiempo de conservación de las bacterias.
Método de ahorro
En condiciones estériles, inyecte parafina líquida esterilizada en el cultivo inclinado recién cultivado, el nivel de líquido es 1 cm ~ 2 cm más alto que la parte superior de la inclinación, agregue un tapón de goma y selle con parafina sólida para aislar las bacterias del aire. La cepa inyectada con aceite de parafina se almacenará en posición vertical en un lugar seco a baja temperatura (4 grados ~ 6 grados) o a temperatura ambiente.
Método de conservación por liofilización
Este método es adecuado para la conservación de la mayoría de los microorganismos, pero no para los hongos filamentosos que no producen esporas. El método de conservación por liofilización es para conservar las bacterias a baja temperatura, en condiciones secas y anóxicas. Es decir, congelar rápidamente la cepa a baja temperatura para mantener intacto el microorganismo, y luego descomprimir y extraer el aire para sublimar el hielo hasta que se deshidrate y seque, y sellar y aislar el aire en estado vacío para detener la actividad metabólica microbiana. , para conservarlo durante mucho tiempo.
Método de ahorro
Agregue el agente protector en el tubo de la ampolla de acuerdo con cierta fórmula y luego agregue las bacterias para preparar la suspensión bacteriana. Liberar previamente el tubo de la ampolla a - 15~- 20 grados, luego secar el tubo de la ampolla con un liofilizador al vacío y sellar el tubo de la ampolla. Conservar a baja temperatura y protegido de la luz.
Método de conservación del tubo de arena.
Este método es adecuado para la conservación de actinomicetos, bacilos, etc. esporógenos, pero no para la conservación de hongos y hongos patógenos que se centran principalmente en el desarrollo de hifas. El uso de arena fina para crear condiciones secas puede ralentizar las actividades metabólicas de aquellos microorganismos que pueden producir esporas o esporas en un ambiente seco, inhibir su velocidad de reproducción y tener una fuerte resistencia a la muerte. Este método puede reducir la mutación de la cepa y prolongar el tiempo de supervivencia.
Método de ahorro
Tamice la arena de río y de mar con mallas 60, deseche las partículas grandes y las impurezas, y luego tamice con mallas 80 para eliminar la arena fina. Absorba el hierro con piedra de absorción de hierro, colóquelo en el recipiente y empápelo con ácido clorhídrico al 10 por ciento. Si hay mucha materia orgánica en la arena del río, empápela con ácido clorhídrico al 20 por ciento. Después de 24 h, eliminar el ácido clorhídrico, remojarlo en agua del grifo varias veces hasta que esté neutro y hornear o secar la arena. Además, diez suelos debajo de la superficie no contaminada se tamizaron durante 100 días, se lavaron hasta neutralidad con agua del grifo y se secaron. Mezcle uniformemente según la arena: suelo=2: 1, subempaque en un tubo de ampolla o tubo de ensayo pequeño, la altura es de aproximadamente 1 cm, tape el tapón de algodón, autoclave a 121 grados durante 1 h ~ 1,5 h, o autoclave en presión normal por 3 veces, 16 veces al día. Séquelo a menos de 50 grados (la temperatura no debe ser demasiado alta, de lo contrario, la materia orgánica del suelo se descompondrá a altas temperaturas para producir sustancias nocivas, lo que afectará el rendimiento de la cepa), y solo se puede usar si no hay crecimiento microbiano después de la inspección.
Luego prepare la suspensión bacteriana y agregue la suspensión bacteriana en el tubo de arena. Coloque el tubo de arena que contiene la suspensión bacteriana en el secador de vacío para el secado al vacío. Use una llama para sellar y derretir la boquilla, guárdela a baja temperatura (4 grados ~ 10 grados) o en un lugar seco a temperatura normal, y verifique regularmente la vitalidad y las bacterias diversas.
Método de conservación de cuentas de porcelana.
Por lo general, existen tubos de conservación de perlas de porcelana terminados que son fáciles de usar en el mercado para la conservación de bacterias a baja temperatura. El tubo de conservación de perlas de porcelana generalmente se compone de un tubo de almacenamiento congelado, así como de la solución de conservación interna y perlas de porcelana. Las perlas de porcelana con superficie cóncava y convexa se utilizan para la adsorción y conservación de bacterias. La tensión se puede almacenar durante mucho tiempo a - 20 grados o - 80 grados. Es más fácil de operar ya sea en almacenamiento o en reanimación.
Método de ahorro
Raspe el cultivo puro de bacterias de la placa y colóquelo en el tubo de conservación del cultivo y configúrelo aproximadamente en 3-4 concentraciones de Michaelis. Agite para emulsionar las bacterias, lave la solución de conservación, apriete el tubo de conservación y congele a baja temperatura.
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