ELISA con mal resultado?Síguenos para elegir la placa Elisa correcta.
Elegir una placa ELISA adecuada es el primer paso para un experimento ELISA exitoso, pero muchas personas lo ignoran. Cuando las personas hacen experimentos, a menudo solo consideran el experimento en sí, pero no saben que el producto suele tener un gran impacto en el experimento. La selección adecuada de productos contribuirá al éxito del experimento. Por lo general, consideramos los siguientes factores cuando realizamos experimentos ELISA:
1. La forma de la parte inferior.
En la actualidad, los fabricantes diseñan los pocillos marcados con enzimas como columnas independientes y aumentan adecuadamente la distancia entre los pocillos para que puedan separarse de forma independiente, minimizando así la contaminación cruzada. Los diferentes tipos de placas Elisa tienen diferentes formas del fondo del pozo. Aquí hay algunas formas comunes de fondo de agujero:
Fondo plano: El fondo es horizontal, también llamado fondo F. La luz no se desviará por la parte inferior, que puede transmitir la luz en la mayor medida. Úselo para experimentos que requieren un fondo redondo por visibilidad u otras razones.
Fondo redondo: también conocido como fondo en U, brinda los mejores resultados de limpieza y rendimiento híbrido, adecuado para aplicaciones que necesitan analizar sedimentos.
Fondo C: Puede proporcionar un buen efecto de limpieza entre el fondo plano y el fondo redondo, mientras combina las ventajas del fondo plano.
Fondo cónico: también conocido como fondo en V, es adecuado para el muestreo y almacenamiento precisos de micromuestras para una recuperación óptima de pequeños volúmenes.
2. El color del plato Elisa
Hay tres colores de la placa Elisa: transparente, blanco y negro.
La mayoría de ELISA eligen placas transparentes como materiales experimentales. Las placas Elisa blancas y negras se utilizan generalmente para la detección de luminiscencia. La propia placa ELISA negra absorbe luz, por lo que su señal es más débil que la de la placa ELISA blanca. Las placas Black Elisa se utilizan generalmente para detectar una luz más fuerte, como la detección de fluorescencia; por el contrario, las placas Elisa blancas se pueden usar para la detección de luz más débil y, a menudo, se usan para la quimioluminiscencia general y el desarrollo del color del sustrato (como la luciferasa dual). análisis del gen reportero).
3. El material de la placa Elisa.
Los materiales comunes son polietileno (PE), polipropileno (PP), poliestireno (PS), cloruro de polivinilo (PVC) y policarbonato (PC).
Los materiales más utilizados en ELSIA son el poliestireno y el cloruro de polivinilo. El tablero blando de cloruro de polivinilo es delgado, se puede cortar y el precio es bajo. La desventaja es que el acabado no es tan bueno como el tablero de poliestireno, y el fondo del agujero no es tan plano como el poliestireno. Pero el valor de fondo correspondiente también aumentará. Por lo general, el tratamiento de injerto iónico se lleva a cabo en la superficie de la placa ELISA y los grupos funcionales activos, como los grupos aldehído, amino y epoxi, se introducen en la superficie del polímero para mejorar el rendimiento de la superficie del sustrato.
4. diferentes mecanismos de unión
La unión eficiente del material de recubrimiento a la superficie inferior de la placa es un paso crucial en ELISA. Por lo tanto, las características estructurales y las propiedades químicas de la sustancia a recubrir deben analizarse cuidadosamente antes del experimento para seleccionar una placa Elisa apropiada. En términos generales, existen varias formas de unir el material de recubrimiento al fondo de la placa: adsorción pasiva, unión covalente y captura por afinidad.
Adsorción pasiva: el mecanismo de adsorción pasiva es complejo y la unión entre el material de recubrimiento y el fondo de la placa se basa principalmente en fuerzas intermoleculares (fuerza de van der Waals) y enlaces de hidrógeno. En la mayoría de los ELISA, la unión de la sustancia de recubrimiento al fondo de la placa se logra mediante adsorción pasiva. Generalmente, la unión entre los antígenos (o anticuerpos) de peso molecular medio y alto y el fondo de la placa se logra mediante adsorción pasiva. Las características hidrofóbicas/hidrofílicas de la superficie inferior de la placa suelen tenerse en cuenta al seleccionar una placa Elisa. La siguiente tabla enumera el ámbito de aplicación y el uso de diferentes superficies de sustrato hidrofílico:
hidrófilo | Unión de prioridad | El uso principal |
- | Moléculas que contienen regiones hidrofóbicas significativas, como: lípidos, lipoproteínas, proteínas grandes | Antígeno ELISA, FlA, LIA |
más | Biomoléculas con propiedades hidrofílicas/hidrofóbicas tales como: proteínas medianas a grandes, inmunoglobulinas, albúmina | ELISA sándwich de doble anticuerpo, ELISA de antígeno |
más más | Biomoléculas con propiedades hidrofílicas/hidrofóbicas como: proteínas pequeñas a grandes, inmunoglobulinas, albúmina, LPS, proteínas fosforiladas, glicoproteínas | ELISA de doble anticuerpo, FIA, LIA |
más más más | Glicoproteínas, moléculas de lípidos polares, fosfolípidos, cardiolípidos | ELISA de antígeno |
Captura por afinidad: La captura por afinidad se basa en la unión específica de macromoléculas marcadas a sus receptores correspondientes. Las macromoléculas marcadas se pueden obtener por acoplamiento químico o por ingeniería genética.
Las características de Affinity Capture son:
1.alta especificidad
2. Puede mejorar la relación señal-ruido de los resultados de medición
Las superficies de fondo de pozo más comunes son: superficie recubierta de estreptavidina (estreptavidina); superficie recubierta de quelato de níquel (Nickel Chelate) y superficie recubierta de glutatión (Glutatión, GSH).
3. Superficie de estreptavidina: la alta afinidad y especificidad de la estreptavidina y la biotina se utilizan para realizar la unión de la placa inferior a la proteína recubierta.
4. Superficie de quelato de níquel: el quelato de níquel se une a la superficie del polímero para unir proteínas de fusión con etiquetas His (histidina).
5. Superficie de glutatión: uso de la enzima y la especificidad de sustrato entre el glutatión y la glutatión sulfhidriltransferasa (GST) para lograr la unión de la placa inferior a la proteína de cubierta.
¿Por qué elegir la placa BKMAM Elisa?
Hecho de material 100 por ciento poliestireno,
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Base plana, grosor uniforme y tamaño uniforme para polos de reacción,
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Alta calidad con precio de fábrica.
