No sé si a menudo necesita comprar consumibles. Si compra con frecuencia consumibles de laboratorio, es posible que varios fabricantes etiqueten sus productos como libres de enzimas, pirógenos y endotoxinas, especialmente para consumibles relacionados con biología celular y biología analítica, como tubos de centrífuga comunes de 15 ml y 50 ml, frascos de cultivo celular, Placas de cultivo celular, placas de cultivo celular, placa de PCR de tubos de crioconservación y otros productos. Los productos con estas descripciones también pueden ser más caros que los productos similares ordinarios. Entonces, ¿cuáles son los significados de estas declaraciones y cómo afectan nuestros experimentos? ¿Cómo debemos tomar decisiones al hacer las compras? Aquí hay una breve introducción.
Definición
1.pirógeno
Pirógeno se refiere a la sustancia pirogénica que puede causar un aumento anormal de la temperatura corporal después de inyectarse en el cuerpo. En un sentido amplio, el pirógeno incluye pirógeno bacteriano, pirógeno macromolecular endógeno, pirógeno endógeno de bajo peso molecular y pirógeno químico. El "pirógeno" aquí se refiere principalmente al pirógeno bacteriano, que es el metabolito de algunos microorganismos, cadáveres bacterianos y endotoxinas.
2. Enzima
Las enzimas se aprendieron en la escuela secundaria. Como catalizador biológico, las enzimas pueden catalizar eficientemente varias reacciones bioquímicas en nuestros organismos. Sin embargo, cuando la mayoría de los productos dicen que no tienen enzima, en realidad, de manera más precisa, no se refieren a todas las enzimas, sino a las nucleasas. Muchos fabricantes también escriben sin ADNasa y sin ARNasa. La nucleasa puede descomponer moléculas de ácido nucleico. Puede degradar específicamente el ADN o el ARN, y también puede actuar sobre moléculas de ADN y ARN con baja especificidad.
3. Endotoxina
Endotoxina es un término general para las sustancias tóxicas que existen en las bacterias gramnegativas. Es el componente de la pared celular de una variedad de bacterias gramnegativas. Es la toxina liberada después de que se rompe la célula y el componente es lipopolisacárido. Generalmente se cree que la endotoxina es un pirógeno. Generalmente es aceptable durante la producción de fármacos: si no hay endotoxina, no hay pirógeno. Por lo tanto, durante la producción, solo se puede realizar la prueba de endotoxinas sin la prueba de pirógenos.
Influencia
El pirógeno y la endotoxina pueden estimular el cuerpo y causar fiebre. En los campos farmacéutico, clínico y otros, por el bien de la seguridad humana, normalmente existen requisitos para la cantidad de pirógeno y endotoxina. En la Farmacopea China, se proporcionan métodos específicos para la detección de pirógenos y endotoxinas. Cuando se trata de laboratorios moleculares, la nucleasa puede degradar fragmentos moleculares objetivo porque puede descomponer el ADN. Por ejemplo, en los experimentos de PCR, si la nucleasa está contaminada, es posible que no haya un valor de CT, lo que da como resultado resultados falsos positivos. Por lo tanto, los consumibles como la ventosa y la PCR suelen estar libres de nucleasas.
Detección de pirógenos y endotoxinas
La siguiente es una breve introducción a las pruebas de pirógenos y endotoxinas en la farmacopea.
1.Pruebas de pirógenos
El método del conejo para la detección de pirógenos se describe en la regla general de la farmacopea china 1142. Use conejos sanos y calificados, inyecte una cierta cantidad de sustancia de prueba en los conejos por vía intravenosa y observe el aumento de temperatura de los conejos dentro del tiempo especificado. Los utensilios de prueba en contacto con el artículo de prueba deben ser estériles y libres de pirógenos. El pirógeno generalmente se elimina mediante esterilización por calor seco (250 grados, más de 30 minutos) u otros métodos apropiados. Si la temperatura del conejo sometido a prueba sube a un cierto estándar dentro de un cierto período de tiempo, se considera que la prueba de pirógenos del artículo de prueba no cumple con los requisitos.
2. Prueba de endotoxinas
Antes de la prueba de endotoxinas, la prueba de limulus se usaba internacionalmente. Los métodos específicos incluyen el método de gel y el método fotométrico. El reactivo de Limulus puede aglutinarse con la endotoxina bacteriana para producir un cambio de gel o turbidez, y el contenido de endotoxina puede determinarse midiendo este cambio. El lisado de amebocitos de Tachypleus es un tipo de reactivo extraído de la sangre del lisado de amebocitos de artrópodos marinos Tachypleus. Por lo tanto, el lisado de amebocitos de Tachypleus ha sido capturado y asesinado en grandes cantidades en todo el mundo, y también se ha convertido en un animal nacional protegido de segunda clase en China. Actualmente, la FDA ha aprobado el método del factor C recombinante para reemplazar el reactivo TAL. Esta ley también ha sido mencionada en los principios rectores de la Farmacopea China.
como seleccionar
De hecho, no es difícil elegir después de entender estos conceptos. Se basa principalmente en sus propias necesidades. Generalmente, los consumibles sin enzimas y pirógenos son comunes, y los productos sin endotoxinas son relativamente pocos. Si el experimento en sí no tiene altos requisitos para estos, se pueden usar consumibles ordinarios. Por ejemplo, cuando se centrifugan células o componentes relacionados, es mejor usar un tubo de centrífuga sin enzimas ni pirógenos, mientras que los tubos de centrífuga ordinarios se pueden usar para la centrifugación de líquidos ordinaria.
Además, esto también es un problema que tendrán muchos usuarios. Al comprar tubos de centrífuga de algunas empresas, preguntarán si los tubos de centrífuga se pueden reutilizar. De hecho, este problema se discutirá de acuerdo con la situación, porque los tubos de centrífuga se han contaminado hasta cierto punto después de usarse una vez, e incluso la esterilización con vapor a presión no puede eliminar completamente la contaminación. Por lo tanto, si lo usa nuevamente, es depende de las propias necesidades del usuario para el experimento.
En el análisis final, todos los productos son para experimentadores y experimentos. No podemos influir en nuestros experimentos debido a los productos, pero debemos elegir los productos apropiados de acuerdo con nuestros experimentos.
Tubo de centrífuga BKMAM sin pirógenos, sin ribozima, sin endotoxinas, 0.5mL, 1.5mL, 2mL, 5mL, 10mL, 15mL, 50mL para elegir.
Tubo de crioviales sin pirógenos, sin ribozima, sin endotoxinas, rosca interna, rosca externa, con 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml para elegir.
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