El conocimiento microbiano que desea
Los microorganismos son un grupo de organismos diminutos que existen ampliamente en la naturaleza y son invisibles a simple vista y deben ampliarse cientos, miles o incluso decenas de miles de veces con la ayuda de un microscopio óptico o un microscopio electrónico. Tienen las ventajas de tamaño pequeño, estructura simple, reproducción rápida, fácil variación y gran capacidad de adaptación al medio ambiente.
Clasificación de los microorganismos:
Hay muchos tipos de microorganismos, por lo menos más de 100,000 tipos. Según su estructura, composición química y hábitos de vida y otras diferencias se pueden dividir en tres categorías.
El núcleo de la célula microbiana eucariota tiene un mayor grado de diferenciación, incluida la membrana nuclear, el nucléolo y los cromosomas; El citoplasma tiene orgánulos completos (como el retículo endoplásmico, el ribosoma y las mitocondrias, etc.). Los hongos pertenecen a este tipo de microorganismos.
Las células microbianas procarióticas tienen un bajo grado de diferenciación nuclear, solo un nucleoplasma primitivo, sin membrana nuclear ni nucléolo; Los orgánulos no son muy completos. Hay muchas especies de tales microorganismos, incluyendo bacterias, espiroquetas, micoplasmas, rickettsias, clamidias y actinomicetos.
Los microorganismos acelulares no tienen una estructura celular típica ni un sistema enzimático para generar energía, y solo pueden crecer y reproducirse en células vivas. Los virus pertenecen a este tipo de microorganismos.
Separación y purificación de microorganismos.
Un cultivo microbiano que contiene más de una especie se denomina cultivo mixto. Si todas las células de una colonia se derivan de una célula parental, entonces la colonia se denomina cultivo puro. En la identificación de especies bacterianas, generalmente se requiere que los microorganismos utilizados sean cultivos puros. El proceso de obtención de cultivo puro se llama separación y purificación, y existen muchos métodos.
1. Método de plato de vertido
Primero, la suspensión microbiana se diluye en una serie, y una cierta cantidad de la dilución se mezcla completamente con el medio de agar nutritivo disuelto mantenido a aproximadamente 40-50 grados, y luego la mezcla se vierte en una placa de Petri estéril. Después de la solidificación, la placa se incubó boca abajo en una cámara constante. Se multiplica una sola célula para formar una colonia, se toma una sola colonia para hacer una suspensión y los pasos anteriores se repiten varias veces para obtener un cultivo puro.
2. Método de recubrimiento de placa plana
Primero, la suspensión microbiana se diluye adecuadamente y una cierta cantidad de la dilución se coloca en una placa de agar nutritivo estéril que se ha solidificado, y luego la dilución se distribuye uniformemente sobre la superficie del medio con una espátula de vidrio estéril. Se puede obtener una sola colonia por incubación a una temperatura constante.
3. Método de trazado de placas
La forma más fácil de aislar microorganismos es rayando. Vierta una pequeña cantidad del cultivo en la placa con un asa estéril. Hay muchos métodos de escritura. Los métodos de escritura comunes que tienen más probabilidades de aparecer como una sola colonia son el método de barra oblicua, el método de la curva, el método del cuadrado, el método de radiación y el método de cuatro cuadrículas. Cuando el bucle de inoculación se mueve hacia atrás en la superficie del medio, el líquido bacteriano en el bucle de inoculación se diluye gradualmente y, finalmente, una sola célula se dispersa en la línea dibujada. Después del cultivo, cada célula se convierte en una colonia.
4. Método de cultivo de enriquecimiento
El método y el principio del método de cultivo de enriquecimiento son muy simples. Podemos crear condiciones que permitan que solo crezcan los microbios deseados, y bajo estas condiciones los microbios deseados pueden competir efectivamente con otros microbios y superar con creces a otros microbios en términos de capacidad de crecimiento. Si se van a aislar algunos parásitos obligados, las muestras deben inocularse en las poblaciones de células huésped susceptibles correspondientes para que crezcan en grandes cantidades. Las bacterias parasitarias puras se pueden obtener mediante siembra repetida.
5. Método anaeróbico
En el laboratorio, para aislar algunas bacterias anaerobias, se puede utilizar como recipiente de cultivo un tubo de ensayo que contenga el medio original, y se puede calentar el tubo de ensayo en un baño de agua hirviendo durante varios minutos para expulsar el oxígeno disuelto en el medio. . Luego se enfría rápidamente y se inocula. Después de la inoculación, se añadió parafina estéril a la superficie del medio para aislar el medio del aire. Otro método es reemplazar el gas en el medio con N2 o CO2 después de la inoculación y luego sellar la boca del tubo de ensayo sobre una llama. A veces, para aislar algunas bacterias anaeróbicas de manera más eficiente, la muestra aislada se puede inocular en el medio y luego la placa de Petri se puede colocar en un dispositivo de cultivo anaeróbico completamente sellado.
6. Método de aislamiento de una sola célula (o una sola espora)
Es tomar el método de microseparación para aislar directamente células individuales o individuos individuales de poblaciones mixtas para cultivo para obtener cultivo puro. Para microorganismos más grandes, se puede extraer un solo individuo usando un capilar. Para microorganismos con individuos relativamente pequeños, se requiere un micromanipulador para recoger células microbianas individuales o esporas con un capilar o microaguja, gancho, lazo, etc. bajo el microscopio para obtener un cultivo puro. El método de separación de una sola célula tiene requisitos relativamente altos en la tecnología de operación.
cultivo microbiano
1. Según si se necesita oxígeno durante el cultivo, se puede dividir en dos categorías: cultivo aeróbico y cultivo anaeróbico.
Cultivo aeróbico: también conocido como “cultivo aeróbico”. Es decir, cuando se cultiva este microorganismo, necesita que se le añada oxígeno, de lo contrario no crecerá bien. En el laboratorio, los cultivos inclinados se obtienen obteniendo aire estéril del exterior a través de tapones de algodón. La mayor parte del cultivo líquido en el matraz Erlenmeyer se agita con un agitador, de modo que el aire exterior pueda entrar continuamente en la botella.
Cultivo anaeróbico: También conocido como “cultivo anaeróbico”. Dichos microorganismos no requieren oxígeno para participar en el cultivo. En el proceso de cultivo de microorganismos anaerobios, el punto más importante es eliminar el oxígeno del medio.
2. Según el estado físico del medio, se puede dividir en dos categorías: cultivo sólido y cultivo líquido.
Cultivo sólido: Es un método de inoculación de las cepas en un medio sólido suelto y rico en nutrientes, y cultivo de microorganismos en condiciones adecuadas.
Cultivo líquido: En los experimentos, el cultivo líquido puede hacer que los microorganismos se multipliquen rápidamente y obtengan una gran cantidad de cultivos. Bajo ciertas condiciones, también es un método efectivo para que los microorganismos seleccionen y enriquezcan las bacterias.
BKMAM biotech proporciona los consumibles de laboratorio correspondientes para el cultivo microbiano:
Placas de Petri redondas/cuadradas de plástico desechables:
lMaterial de poliestireno de alta transparencia (PS);
lLa superficie es lisa y plana, y no hay distorsión óptica de las células bajo la observación del microscopio;
l El diseño de apilamiento facilita el apilamiento y el almacenamiento;
l Esterilización con óxido de etileno (EO);
l Resistencia al desgaste ya la corrosión.
Palo/lazo de inoculación de plástico desechable:
material de poliestireno (PS);
Anticontaminación, libre de endotoxinas, DNasa, RNasa y pirógenos;
El embalaje independiente ha sido esterilizado;
Mano de obra fina y especificaciones completas;
Esparcidor de células de plástico desechable, esparcidor de bacterias:
material de poliestireno (PS);
Anticontaminación, libre de endotoxinas, DNasa, RNasa y pirógenos;
Diseño en forma de L, fácil de usar;
Uso único, ligero y conveniente.
Acero inoxidable / Placas de especificación estériles desechables:
La placa de especificaciones de acero inoxidable está hecha de acero inoxidable y la placa de especificaciones desechable está hecha de polipropileno (PP) apto para alimentos.
Anticontaminación, libre de endotoxinas, DNasa, RNasa y pirógenos;
El área de frotis está estrictamente estandarizada
Un lado de la placa de especificaciones está equipado con un mango, que es fácil de operar
Paquete único sellado estéril para evitar la contaminación secundaria del muestreo y el error en los resultados
Uso único para evitar la contaminación cruzada y reducir la carga de trabajo
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miguel peng
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